狼疮肾炎患者临床检测指标的诊断价值分析

本研究旨在以肾穿刺活检技术为狼疮肾炎(Lupus Nephritis,LN)诊断金标准,探讨OX40/OX40L m RNA,抗双链DNA(double-stranded,ds DNA)抗体及抗C1q抗体水平检测在LN中的诊断效能。方法:1.对象:根据1997年美国风湿病学会修订的SLE分类标准[1],入选本次试验组的80例系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)患者均符合相应要求。另根据LN的诊断规则,将该受试人群分为LN组及非LN组,各计40例。此外,共计有60例患者接受肾穿刺活检技术检测,其中LN组及非LN组各30例。2.标本采集:患者均于清晨空腹采集外周静脉血,并置于乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid,EDTA)抗凝采血管中以备OX40/OX40L m RNA表达水平的检测;另取一份血标本置于促凝管中,3000r/min离心5min,析出血清用于抗C1q抗体及抗ds DNA抗体检测。3.应用自制的OX40/OX40L m RNA阳性定量标准品通过荧光定量Real-time PCR绝对定量绘制出标准曲线,进而对待检样品进行定量检测。4.应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA),根据试剂盒说明书相关要求对抗C1q抗体的吸光度OD值进行测定,而后根据标准曲线的直线回归方程式对其进行量值测定。5.应用全自动自身抗体分析仪根据试剂盒说明书定量检测抗dsDNA抗体。6.统计学分析方法:⑴对LN组、非LN组应用统计学软件SPSS19.0进行组间及组内各指标的统计学分析,其中通过均数±标准差(±s)对计量资料进行描述;应用t检验对两组间数据进行比对分析;应用Spearman检验进行数据间的相关性分析。统计学界值:本次试验采用单侧t检验,以P<0.001为差异有统计学意义。⑵针对上述四种检测指标进行受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,简称ROC曲线)绘制,分析各指标在LN中的灵敏度及特异性,再经最大约登指数(灵敏度+特异度-1)计算得出LN诊断临界值。结果:1.LN组较非LN组,其疾病活动指数(Systemic Lupus Erythematosus DiseaseActivity Index,SLEDAI)、OX40/OX40L m RNA的表达情况、抗ds DNA抗体及抗C1q抗体水平差异均有统计学意义(P<0.001),且疾病活动指数SLEDAI与抗ds DNA抗体、抗C1q抗体水平、OX40 m RNA的表达呈正相关。2.通过ROC曲线分析以及约登指数的计算可知:⑴OX40 m RNA以5.5250×106copy/μL为临界值,灵敏度与特异性分别为0.867,0.8,曲线下面积(Area Under The Curve,AUC)为0.903,最大约登指数为0.667;⑵OX40L m RNA以4.2550×103 copy/μL为临界值,灵敏度与特异性分别为0.5,1,AUC为0.783,最大约登指数为0.5;⑶抗ds DNA抗体以121.8450 IU/m L为临界值,灵敏度与特异性分别为0.567,1,AUC为0.741,最大约登指数为0.567;⑷抗C1q抗体以11.6550 IU/m L为临界值,灵敏度与特异性分别为0.8,0.8,AUC为0.841,最大约登指数为0.6。结论:1.LN组较非LN组,SLEDAI、OX40/OX40L m RNA、抗C1q抗体、抗ds DNA抗体均有显著性升高,说明各指标对于肾损伤有特异性变化,可用于LN的诊断。2.以肾活检为金标准建立受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)可知,各诊断指标对于LN的诊断效能由强至弱依次为OX40 m RNA、抗C1q抗体、抗ds DNA抗体、OX40L m RNA。3.本实验室建议各指标用于诊断LN的临界值为:OX40 m RNA=5.5250×106copy/μL;抗C1q抗体=11.6550 IU/m L;抗ds DNA抗体=121.8450 IU/m L;OX40L m RNA=4.2550×103 copy/μL。4.建议多指标联合检测,以提高LN诊断的准确性,在必要时仍需考虑肾活检的应用。 

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OX40mRNA实时荧光定量曲线

OX40LmRNA实时荧光定量曲线

OX40mRNA实时荧光定量曲线

OX40LmRNA实时荧光定量曲线